本產品用 E.coli 作為宿主表達得到的重組蛋白往往會形成包涵體，其中的重組蛋白質只完成部分折疊，還沒形成最后的正確空間結構，所以沒有生物活性，要得到有活性的重組蛋白，還需要后續的溶解和復性（重折疊）處理。
采用溫和法溶解包涵體，釋放的包涵體蛋白質不徹底變性，還能保持其部分折疊的結構，使后續的復性處理效率提高。包涵體變復性是通過特定技術處理細菌表達產生的無活性蛋白凝聚物的過程。包涵體主要由超過50%的重組蛋白及核糖體元件、質粒DNA等雜質組成，需經破菌、洗滌、溶解三步處理后，采用稀釋復性、柱上復性等方法恢復蛋白活性。該現象主要由基因工程菌表達產率過高、重組蛋白含硫氨基酸比例大及缺乏折疊輔助因子導致。復性過程需在pH 8.0-9.0緩沖液中通過氧化還原系統調控二硫鍵形成，常規復性效率約20%，柱上復性可通過五倍稀釋實現90%以上回收率。低濃度變性劑洗滌和分子伴侶應用可有效提升復性產率。
商品信息已成功復制，啟研竭誠為您服務
