蛋白 G抗體純化試劑盒
名稱：蛋白G抗體純化試劑盒
英文名稱：ProteinG-agarose Antibody Purification Kit
目錄號：QYP1053A (1ml) ，QYP1053B (6ml)， QYP1053C (12ml)
存條件：室溫（15-25℃), 4℃
保質期：1 年
包含試劑：
試劑盒組成
試劑盒組成英文名稱
QYP1053A (1ml)
QYP1053B (6ml)
QYP1053C (12ml)
ProteinG-瓊脂糖凝膠預裝柱
ProteinG-agarose Column
1ml
凝膠約0.5ml
6ml
凝膠約3ml
12ml
凝膠約6ml
抗體純化平衡液
IgG Balance Buffer
20mL
100ml
200ml
抗體純化洗滌液
IgG Wash Buffer
10ml
50ml
100ml
抗體純化洗脫液
IgG Elution Buffer
10ml
50ml
100ml
抗體純化中和液
IgG Neutralization Buffer
1ml
5ml
10ml
保存條件：Protein G-瓊脂糖凝膠預裝柱4℃保存，其他組分室溫保存。
產品介紹：
蛋白G抗體純化試劑盒用于實驗室的常規抗體親和純化操作（單抗、多抗）。每根柱子可至少反復使用9 次。含抗體（IgG）的樣本（血清、腹水、細胞培養上清）流經Protein G -瓊脂糖凝膠柱，樣本中的IgG 與Protein G -瓊脂糖凝膠特異性結合，非IgG組分則不與柱子結合。
蛋白 G 是源自鏈球菌的細胞壁蛋白，在大腸桿菌中以重組形式生產。與蛋白A相同，蛋白G可與大多數哺乳動物的免疫球蛋白結合，結合部位主要為其Fc區。天然蛋白G包含兩個免疫球蛋白結合位點以及白蛋白和細胞表面結合位點。重組形式的蛋白G中已除去這些白蛋白及細胞表面結合位點，以減少免疫球蛋白純化過程中的非特異性結合。重組蛋白G分子量約為21.6kDa，但在SDS-PAGE中表觀大小為31至34kDa。IgG 結合功能在 pH 值為 5 時較佳，但在近中性條件（pH 值 7.0 至 7.2）下也可高效結合。
蛋白 G 可與人、小鼠和大鼠血清中更廣泛的 IgG 亞類結合。其中，除了與蛋白A一樣能夠結合其他類型免疫球蛋白之外，蛋白G還對人IgG3、小鼠IgG1和大鼠的全部三種IgG亞型具有特別強的結合能力。因此，在涉及這些物種和抗體亞型的應用中一般建議采用蛋白G。關于其他物種，蛋白 G 對牛、山羊和綿羊 IgG 的結合能力更強，但對豬、豚鼠、犬和貓 IgG 的結合能力弱于蛋白 A。蛋白 G 瓊脂糖可從許多哺乳動物物種的血清和其他液體中有效地親和純化 IgG。除了來自人、山羊和綿羊樣品的大多數 IgG 同種型外，蛋白 G 還特別適用于純化小鼠IgG（包括 IgG1）。
樣本經洗滌液洗滌除雜后，加入洗脫液洗脫IgG，并用中和液調節pH 。本試劑盒內含1 根Protein G-瓊脂糖凝膠柱，每ml 凝膠可結合約10mg 人類IgG 或約7mg小鼠IgG。實驗例
實驗名稱：Protein G -agarose 抗體純化試劑盒純化抗體
試劑準備：
每1-2ml 血清或腹水采用1ml Protein G -agarose 進行純化。細胞上清中抗體濃度較低，建議鹽析濃縮抗體，并使用PBS 透析之后再進行過柱純化。
上柱之前，應盡可能使樣本澄清。腹水中雜質較多，推薦在10000g，4℃離心20min ，棄去沉淀。用濾紙過濾，再用0.44um 濾器過濾，之后上柱。
如不過濾樣本，直接上柱，樣本中的雜質容易堵柱子，使實驗時間延長，抗體純度和產率降低。
實驗方案
以1ml 血清使用1ml Protein G -agarose 柱子純化為例
1. 拔下Protein G -瓊脂糖凝膠柱上下蓋，棄去柱內液體。
2. 用10ml 平衡液洗柱子。
3. 將預先處理過的血清上柱。用50ml 離心管接住血清上柱流穿液，重復上柱，共上柱3 次。
4. 用10ml 洗滌液洗柱子。
5. 取7 個1.5ml 離心管，每管加入100ul 中和液。
6. 加入10ml 洗脫液洗脫抗體。將樣本收集到上述EP 管中，每管收集900ul ，總體積1ml。
7. 洗脫液自然流出后，用10ml 平衡液洗柱子。
8. 使用后的柱子應加入
商品信息已成功復制，啟研竭誠為您服務
