甘油三酯（triglyceride,TG）含量測定試劑盒--微量法 (QYT5288)
產品名稱：甘油三酯（triglyceride,TG）含量測定試劑盒--微量法
貨號：QYT5288
規格：100T/96S
注意：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義：
TG是長鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子，不僅是細胞膜的主要成分，也是重要呼吸底物。
測定原理：
用異丙醇提取TG，脂蛋白酯酶水解TG生成甘油和脂肪酸（FFA），甘油與三磷酸腺苷在甘油激酶和磷酸甘油氧化酶催化下生成H2O2，過氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比林偶聯酚，生成有色化合物，在505 nm處有特征吸收峰。
需自備儀器和用品：
可見光分光光度計/酶標儀、研缽/勻漿器/細胞超聲破碎儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺式離心機、可調式移液槍、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
試劑一：液體120 ml×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體12 ml×1瓶，4℃保存。
試劑三：液體12 ml×1瓶，4℃避光保存。
標準品：粉劑5mg×1支，4℃保存；臨用前加5ml試劑一，即1mg/ml甘油三酯標準溶液，-20℃分裝保存2周，避免反復凍融。（注：若粉劑不易溶解，可置于4℃搖床輕柔振蕩至完全溶解）
樣本處理：
1. 組織中TG的提取：按照組織質量（g）：試劑一體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入 1ml試劑一）進行冰浴勻漿，8000g，4℃離心10min，取上清，即TG待測液。
2. 細胞、細菌中TG的提取：先收集400-500萬細胞或細菌到離心管內，離心后棄上清，加1ml試劑一， 超聲波破碎1min（強度20%，超聲2s，停1s），8000g，4℃離心10min，取上清，即TG待測液。
3. 血清（漿）等液體樣本：直接測定。
測定步驟：
1. 分光光度計/酶標儀預熱30min，調節波長到505 nm，分光光度計用蒸餾水調零。
2. 操作表：（在EP管中進行下述實驗）
試劑（μl）
空白管
測定管
標準管
樣本
-
10
-
標準品
-
-
10
試劑一
10
-
-
試劑二
95
95
95
試劑三
95
95
95
混勻，室溫下靜置20min，于505nm波長處讀取吸光值，記為A空白管、A測定管和A標準管，ΔA測定=A測定管-A空白管，ΔA標準=A標準管-A空白管。空白管和標準管只需測1-2次。
商品信息已成功復制，啟研竭誠為您服務
